新 C18 液相色譜柱活化是非常重要的一步,可以確保色譜柱的性能和壽命。以下是一些常用的 C18 液相色譜柱活化方法:
1. 用有機(jī)溶劑沖洗:首先用甲醇或乙腈等有機(jī)溶劑沖洗色譜柱,以去除固定相表面的雜質(zhì)和空氣泡。通常需要沖洗數(shù)小時,直至基線平穩(wěn)。
2. 用高濃度的緩沖溶液沖洗:然后用高濃度的緩沖溶液沖洗色譜柱,以使固定相表面的硅羥基與緩沖溶液中的離子相互作用,從而改善色譜柱的性能。通常需要沖洗數(shù)小時,直至基線平穩(wěn)。
3. 用流動相平衡:最后用流動相平衡色譜柱,以使固定相表面的硅羥基與流動相中的有機(jī)溶劑相互作用,從而改善色譜柱的分離效率和峰形。通常需要平衡數(shù)小時,直至基線平穩(wěn)。
4. 進(jìn)行柱前過濾:在使用新色譜柱之前,建議在進(jìn)樣器和色譜柱之間安裝一個過濾器,以防止顆粒物堵塞色譜柱。
需要注意的是,不同品牌和型號的 C18 液相色譜柱可能需要不同的活化方法,因此在使用新色譜柱之前,建議查看相關(guān)的說明書或咨詢色譜柱生產(chǎn)商。此外,在使用新色譜柱時,還需要注意流動相的組成和流速,以避免色譜柱受到污染或損壞。
發(fā)布于: 2023-08-26