一、色譜柱的堵塞:
? ? ? ?任何來自流動相或樣品的顆粒物質都會污染色譜柱濾網,一些顆粒還可能遷移到柱子填料中,這將導致柱子背壓的增加。這給泵帶來了更大的壓力,并可能導致柱子沉降,產生空隙從而導致峰的分裂。高效液相色譜柱在使用過程中會遇到許多不同的物質,如緩沖液中的鹽或流動相和樣品中的雜質,這些物質可能比被分離的分析物有更少或更多的保留。這些不希望出現的干擾,如果被檢測器觀察到,就會表現為鬼峰、斑點、基線顛倒甚至是負峰。吸收的雜質可能對保留機制產生負面影響(縮短保留)或開始作為新的固定相(增加保留)。
? ? ? ?HPLC?色譜柱是?HPLC?系統的關鍵部件,需要小心處理和保護。HPLC?系統的高效運行取決于流動相和樣品是否不含化學雜質或固體懸浮液。頻繁更換色譜柱的成本很高,因此您的目標應該是最大限度地延長色譜柱的使用壽命,以便每次都能獲得所需的準確度和一致性結果。
二、延長色譜柱壽命的最可靠的解決措施是什么?
? ? ? ?當然是使用保護柱! 保護柱會過濾所有的顆粒,積累非特異性的吸附物質,也會延長在微堿性pH值下使用的分析柱的壽命。但需要注意的是,保護柱的顆粒最好與分析柱的顆粒大小相同、材料類型相同、壓力規格也應與主柱相匹配。還有就是,什么時候更換保護柱比較好呢?一般建議是當樣品的性質發生變化時,當背壓增加約10%-15%時,或按計劃/時間更換保護柱(例如,每200-500次注射–取決于注射量和樣品的純度)。保護柱對于任何從事色譜工作的分析員來說都很熟悉,保護柱是一種典型的色譜耗材,它安裝在主柱前面,通過收集和捕獲顆粒或不可逆結合物質來保護主柱免受來自樣品、基質或洗脫液的雜質的影響。它延長了更昂貴的主柱的生命周期并且作為更便宜的組件,更換更頻繁。
三、液相保護柱的注意事項:
1.注意每次操作時都要按照標注方向來使用。
2.不使用保護柱會使分析柱或制備柱直接受到污染,從而縮短其實際使用壽命。
3.選擇保護柱體積可按照色譜柱體積的5~10%即可。
4.選擇保護柱柱芯的填料最好和色譜柱內的填料相同。
? ? ? ?恒譜生保護柱為色譜柱提供方便、經濟和有效的保護,延長了液相色譜柱的壽命,保證分析結果的重現性。隨著使用時間的增加,高效液相色譜柱分離效能下降,柱壓增高,其原因主要是由于色譜柱進口段的少量色譜硅膠填料被污染引起的,而色譜柱整個柱床并未被破壞,使用色譜柱保護柱,相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料,起到了保護整個色譜柱的作用。
? ? ? ?今天恒譜生分享的知識先到這啦,希望對您的工作有所幫助!
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發布于: 2022-12-03